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本法系比較組胺對照品(S)與供試品(T)引起麻醉貓(或狗)血壓下降的程度,以判定供試品中所含降壓物質的限度是否符合規定。
組胺對照品溶液的配制精密稱取磷酸組胺對照品適量,按組胺計算,加水溶解使成每1ml中含1.0mg的溶液,分裝于適宜的容器內,4~8℃貯存,如無沉淀析出,可在3個月內使用。
對照品稀釋液的配制臨用前,精密量取組胺對照品溶液適量,用氯化鈉注射液配成每1ml中含組胺0.5μg的稀釋液。
供試品溶液的配制按正文規定的劑量,配成適當濃度的供試品溶液;試驗時,一般要求供試品溶液與對照品稀釋液的注入體積應相等。
檢查法取健康無傷、體重2kg以上的貓(或體重5kg以上的狗),雌者無孕,用適宜的麻醉劑(如巴比妥類)麻醉后,固定于保溫手術臺上,分離氣管并插入插管以使呼吸暢通,必要時可行人工呼吸。在一側頸動脈插入連接測壓計的動脈套管,管內充滿適宜的抗凝劑溶液,以記錄血壓,也可用其他適當儀器記錄血壓。在一側股靜脈內插入靜脈插管,供注射藥液用。試驗中應注意保持動物體溫。全部手術完畢后,將測壓計調節到與動物血壓相當的高度(一般為 13.3~16.0kPa),開啟動脈夾,待血壓穩定后,即可進行藥液注射。各次注射速度應相同,每次注射后立即注入一定量的氯化鈉注射液,相鄰兩次注射的間隔時間應一定(3~5分鐘),每次注射應在前一次反應恢復穩定以后進行。自靜脈輪流注入上述對照品稀釋液,劑量按動物體重每1kg注射組胺 0.05μg、0.1μg及0.15μg,每個劑量應各重復2~3次,如0.1μg劑量所致的血壓下降值均不小于2.67kPa,同時相應各劑量所致反應的平均值有差別,可認為該動物的靈敏度符合規定。
取對照品稀釋液按動物體重每1kg注射組胺0.1μg的劑量(ds),供試品溶液按正文中規定的劑量(dT),照下列次序注射一組4個劑量:ds、dT、dT、ds.然后以第一與第三、第二與第四劑量所致的反應分別比較。如dT所致的反應值均不大于ds所致反應值的一半,即認為供試品的降壓物質檢查符合規定。否則應按上述次序繼續注射一組4個劑量,并按相同方法分別比較兩組內各對ds、dT劑量所致的反應值;如dT所致的反應值均不大于ds所致的反應值,仍認為供試品的降壓物質檢查符合規定;如dT所致的反應值均大于ds所致的反應值,即認為供試品的降壓物質檢查不符合規定;否則應另取動物復試。如復試的結果仍有dT所致的反應值大于ds所致的反應值,即認為供試品的降壓物質檢查不符合規定。
所用動物經靈敏度檢查如仍符合規定,可繼續用于降壓物質檢查。
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