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色譜法
l 色譜法:是一種物理或物理化學分離分析方法,將混合物中各組分分離后在線或離線分析的方法。是分析混合物的最有效的手段。
l 應用范圍:定性鑒別、純度檢查、含量測定。
§1. 概論
★★一、基本原理
色譜過程是物質分子在相對運動的兩相(固定相和流動相)間分配平衡的過程,可用分配系數(K )和容量因子(k)來描述。
混合物中,若兩組分的 K或 k不等,則被流動相攜帶的速度不等,產生差速遷移,從而被分離。
1. 分配系數K:組分在固定相和流動相之間達到分配平衡時的濃度之比。
K = Cs/Cm
K:與組分自身特性、固定相、流動相的性質及溫度有關
2. 容量因子k (質量分配系數):達分配平衡后,組分在固定相和流動相中的質量之比。
k = Ws/Wm
k與K的關系: k = Cs·Vs/(Cm·Vm )= K(Vs/Vm)
k: 與組分、固定相、流動相的性質及溫度有關;還與兩相體積有關。
不同組分之間的 k 差異是色譜分離的先決條件
3. 色譜過程方程 tR=t0(1+K·VS/Vm)=t0(1+k)
二、分類:
《中國藥典》將色譜法分為紙色譜法、薄層色譜法、柱色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法、電泳法
1. 按分離原理分類:
吸附色譜法:固定相為固體(吸附劑) 如GSC、LSC
分配色譜法:固定相為液體 如GLC、LLC
離子交換色譜法:固定相為離子交換樹脂,適用于離子型的有機物或無機物的分離分析
分子排阻色譜法(空間排組色譜法、凝膠色譜法):固定相為多孔性填料(凝膠)
2. 按操作形式分類:柱色譜法、平面色譜法、電泳法
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