發表時間:2010/5/4 10:31:36 來源:互聯網
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熱力學水活度(thermodynamic water activity, αw)是指在特定溫度和壓力條件下,有機溶劑反應體系中酶的活性與水含量的關系的―種描述。αw是反應體系巾水的摩爾分數χw與水活度系數γw的乘積,唪αw =γwχw。γw是溶劑疏水性的函數,溶劑疏水性越大,γw越大。在平衡狀態時,反應體系中各組分(酶、溶劑、底物和產物等)的αw是相同的。酶活性與反應體系的熱力學水活度直接相關,例如米赫毛霉脂肪酶(Mucor miehei lipase)在水活度為0.55時,在不同極性的溶劑中都表現出最高的酶活性,其中在正己烷溶劑中活性最強,有機溶劑中過多的水或過少的水都會影響酶活性。Valivety等對不同來源的5種脂肪酶進行了研究,發現酶的催化活性與水活度相關,但是不同酶在相同有機溶劑中的最佳水活度值不同,這可能是由于酶分子結構的差異性所造成的。
水活度或水含量的增加會導致酶催化反應中某種底物rm值的增加,例如在二嚅烷溶劑中,聚乙二醇修飾的枯草桿菌蛋白酶(PEG-subtilisin)催化丁酸乙烯酯3與正己醇4酯交換生成丁酸已酯5。由于在酯化反應中,水是一種抑制劑,它與底物競爭?;?酶中間體,促進逆反應。因此,在有機溶劑反應體系中,親核性試劑的rm會隨水含量的增加而增加,例如枯草桿菌蛋白酶(subtilisin)對正己醇的表觀Km(即Km.唧)隨水濃度增加而增加,而?;噭┒∷嵋蚁サ腒m不受溶劑的影響(表5-2)。因此,水活度(珥y)值將影響水解酶催化酯化或轉酯反應的平衡。
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